凝胶色谱柱的老化与性能衰减是影响分离效率的关键问题，其核心诱因包括填料污染、孔径堵塞与固定相降解?？蒲У脑偕砜墒怪Щ指粗脸跏贾档?0%以上，显著延长使用寿命。?
老化特征需精准识别。轻度老化表现为理论塔板数下降10%-20%，分离度降低但基线仍稳定；中度老化时出现峰形拖尾(不对称因子>1.3)，压力升高15%以上；严重老化则伴随保留时间漂移(RSD>5%)，甚至出现鬼峰。通过对比新柱与使用中柱的标准品色谱图，可快速判断老化程度：聚苯乙烯标样(分子量104-106)的分离峰若出现重叠或展宽，说明孔径分布已受影响。?
分级再生策略针对性更强。轻度污染采用梯度冲洗：先以50%甲醇-水冲洗20柱体积，再用纯甲醇冲洗10柱体积，较后换回流动相平衡。该方法对蛋白质残留导致的老化效果好，可使柱效恢复90%。中度老化需使用专用清洗剂：针对疏水性污染物，用四氢呋喃(THF)以0.5mL/min流速冲洗15柱体积；离子型污染物则采用0.1% C?HF?O?反向冲洗，注意压力需控制在额定值的70%以内。某实验室数据显示，该法可使受污染的葡聚糖凝胶柱寿命延长6个月。?
深度再生需谨慎操作。对于孔径严重堵塞的硅胶基质柱，可用0.05mol/L硝酸溶液冲洗(适用于pH耐受范围2-8的柱型)，再用超纯水过渡至流动相。聚合物基质柱可尝试50℃温水冲洗(温度不超过填料玻璃化温度)，利用热运动促进污染物脱附。但需注意：再生次数不宜超过5次，否则会导致填料粒径分布改变，使分离重现性下降。?
日常维护是防老化的核心。每次实验后立即用10柱体积的纯溶剂冲洗，避免样品残留；长期停用前，需根据填料类型保存：硅胶柱用纯乙腈封存，葡聚糖柱则需加0.02%NaN?防止微生物滋生。流动相需经0.22μm滤膜过滤并脱气，减少颗粒物与气泡对填料的损伤。设置柱温上限(硅胶柱≤60℃，聚合物柱≤80℃)，避免固定相热降解。?
使用习惯影响老化速率。样品需经0.22μm滤膜过滤，高浓度样品(>10mg/mL)应稀释后进样，避免过载污染。梯度洗脱时，有机相比例变化速率不宜超过5%/min，防止固定相溶胀/收缩过快。实验间隔超过8小时时，需用低流速(0.1mL/min)维持柱压，避免填料干涸。某药企的实践表明，规范操作可使凝胶色谱柱的使用寿命从300次进样延长至500次以上，单次分析成本降低40%。?
实际应用中，需根据柱型特性调整方案：Sephadex系列适合温和的aqueous再生体系，而PLgel等有机相柱则需有机溶剂冲洗。通过结合精准的老化判断、分级再生与预防性维护，可较大化发挥凝胶色谱柱的性能潜力，为高分子材料分析提供稳定可靠的分离平台。
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